定量PCR技术服务(Real-time PCR)

定量PCR(Quantitative PCR, qPCR),也称实时PCR(Real-time PCR)或者实时定量PCR,是指借助荧光染料或荧光标记的特异性探针,在PCR指数扩增期间实时监测PCR反应体系中的荧光信号强度的变化,从而对目的基因进行定量分析的PCR检测技术。该技术具有特异性强、灵敏度高、污染途径少、检测方法准确等特点,实现了PCR由定性到定量的飞跃,已成为国际公认的核酸定量的标准方法,广泛应用于基因表达丰度、拷贝数等研究及临床疾病检测等许多领域。
碧云天的定量PCR(Quantitative PCR, qRCR)技术服务是采用SYBR Green I荧光染料法或TaqMan荧光探针法对DNA/RNA进行相对定量或绝对定量。相对定量:通过2-ΔΔCt法计算比较目的基因和内参基因(常用GAPDH、β-actin和36B4等)的表达倍数差异进行相对定量;绝对定量:需要先制备标准品,然后在检测目的基因的同时检测标准曲线,通过比对标准曲线对未知浓度的样品进行绝对定量,最终计算出样品中特定核酸的拷贝数、摩尔数或者微克数等。 碧云天凭借多年的PCR相关试剂盒,特别qPCR试剂盒的研发经验,拥有专业的技术团队,可以针对客户的不同实验目的设计实验方案,提供DNA、mRNA、长链非编码RNA(long non-coding RNA, lncRNA)水平、非编码小RNA(non-coding small RNA, ncsRNA,包括miRNA、piRNA、siRNA、tRF等)相对定量或绝对定量的检测服务,交付真实准确的原始数据和检测报告。 客户仅需提供样品和待检测目的基因的信息,碧云天提供从样品处理到最终的检测报告的全程服务。客户无需再担心RNA抽提容易降解(免费赠送适量RNALater™动物组织RNA稳定保存液)、qPCR引物设计不佳、操作不熟练致数据波动性大等一系列问题。详细的碧云天定量PCR技术服务介绍请点击碧云天定量PCR技术服务介绍

碧云天定量PCR技术服务项目表
项目编号 服务项目 服务内容 周期 (工作日) 全额预付特价(元) 半额预付特价(元) 零首付价(元) 交付结果
T0501 RNA抽提+反转录 RNA抽提+
反转录
1周 80元/样 90元/样 100元/样 RNA浓度数据,cDNA
T0502 基因组DNA抽提 基因组DNA抽提 1周 30元/样 40元/样 50元/样 DNA浓度数据,DNA
T0503 qPCR相对定量(SYBR Green I法) 目的基因或内参基因检测 2-3周 50元/3复孔 60元/3复孔 70元/3复孔 原始数据及定量分析结果,熔解曲线图,扩增曲线图,实验报告
T0504 qPCR绝对定量(SYBR Green I法) 4-5周
T0505 qPCR相对定量(TaqMan法) 3-4周
T0506 qPCR绝对定量(TaqMan法) 4-5周
T0507 qPCR引物设计合成 优化引物设计合成(染料法) 1周 80元/对 90元/对 100元/对
T0508 Taqman探针设计与合成 优化引物/探针设计与合成(探针法) 1-2周 800元/条 900元/条 1000元/条
T0509 定量PCR标准品构建 绝对定量 1-2周 500元/基因 550元/基因 600元/基因
T0510 定量PCR标准曲线构建 绝对定量 1周 350元/基因 400元/基因 450元/基因
T0511 其它定量PCR相关技术服务 自定义 咨询 询价 询价 询价
碧云天定量PCR技术服务询价与订购
  1. 请您下载并填写《碧云天定量PCR技术服务询价单》 ,发送至service@beyotime.com,我们将第一时间为您提供报价。
  2. 若有订购意向,碧云天的技术服务人员会与您联系,并签订《碧云天定量PCR服务协议书》。
  3. 送样时,请下载并填写《碧云天定量PCR技术服务生物样本信息表》,发送至service@beyotime.com或碧云天定量PCR检测技术服务人员邮箱,样品的具体要求参见《碧云天定量PCR技术服务生物送样要求》。碧云天可免费赠送适量RNALater™动物组织RNA稳定保存液。
碧云天定量PCR技术服务优势
  1. 高品质:碧云天拥有专业的技术团队,提供严谨的实验设计,每个样品均进行三次平行实验,免费数据分析,交付原始检测数据和定量PCR检测报告。
  2. 服务全:碧云天基于多年的研发经验,提供从引物和探针设计到相对或绝对定量分析的全套服务,客户可根据实验需要选择SYBR Green I荧光染料法或TaqMan荧光探针法。
  3. 效率高:碧云天成熟稳定的检测体系,多年的定量PCR检测经验,可在最短时间内交付检测结果。
  4. 仪器好:碧云天拥有ABI7500、7900等qPCR仪,通量大,可靠性强。
碧云天定量PCR技术服务流程
碧云天定量PCR技术客户须知
  1. 样品要求:客户需提供尽量多的新鲜或保存完好的样品:细胞(≥1×106),组织(≥20 mg),血液(≥100μl),DNA样品(≥2μg,OD260/OD280在1.7-1.9之间,完整性好),RNA样品(≥2 μg,OD260/OD280在1.9-2.1之间,完整性好) ,反转录的cDNA (≥2μg,纯度在1.9-2.1之间,完整性好)。
  2. 保存及运输:
    1. 对于RNA的定量PCR检测:组织或细胞样品推荐使用碧云天的RNALater™动物组织RNA稳定保存液(R0118)(可免费适量赠送),以便于后续的保存和运输;组织样品也可以液氮速冻后保存于-80℃,细胞也可以在加入Trizol后保存于-80℃,后续样品需用干冰寄送。样品需要注意避免各类污染和反复冻融。
    2. 对于DNA的定量PCR检测:组织或细胞样品推荐使用碧云天的AllProtect™动物组织核酸、蛋白稳定保存液(R0121),以便于后续的保存和运输;组织样品也可以液氮速冻后保存于-80℃,细胞也可以收集后直接保存于-80℃,后续样品需用干冰寄送。样品需要注意避免各类污染和反复冻融。
  3. 样品信息:客户需提供待检测目的基因的GenBank Accession Number或基因序列。并请尽量提供待检测样品的生物物种信息(如Human、Mouse、Rat等),组织信息,DNA/RNA来源、基因丰度等,这些信息有助于我们快速完成实验设计并完成定量PCR技术服务。
  4. qPCR引物:客户可以提供确保有效的qPCR引物,也可由碧云天设计合成,但需另外收取费用。
碧云天定量PCR技术服务承诺
  1. 碧云天承诺提供严谨的实验设计,每个样品三次平行实验,保证实验结果的准确性。
  2. 碧云天交付详细的检测报告(包括实验试剂、材料仪器、软件设置参数、实验方法、结果及分析等)。
  3. 碧云天同时提供RNA或DNA的浓度数据和qPCR的原始数据(包括熔解曲线和扩增曲线)。